菌种分离的方法有哪六个
野生菌种收集方法？
野生菌种收集方法？
野生菌株的收集方法主要包括:
1.采集地点:可在当地山上落叶多的山谷、树林中采集。
2.具体措施:将略硬的熟米饭(1kg~1.5kg)装入干净的杉木制成的小木盒(25cm×20cm×10cm)中，用宣纸盖好，封口，埋在当地山上落叶多的山谷林中。
为了防止野生动物，最好用铁丝网把木箱盖上。夏季三到五天，春秋六到七天后，周围的土著微生物潜入大米中，在大米上形成白色菌落(放置时间长了会形成白色菌落，虽然也可以，但最好用白色菌落)。
3.膨胀法:土著菌收集成功后，加入原料1/3左右的红糖，搅拌均匀(用量为广口瓶容量的1/3)，将软化后的大米放入广口瓶中，盖上宣纸，用细绳扎紧瓶口，置于18℃左右的温度下。
如果放置7天左右，会变成粘稠的液态，会残留一些米粒，但不会碍事。经过简单过滤，就是土传微生物菌种的原液。使用时直接稀释，和
菌种退化怎么办？
菌种的退化是客观规律，退化的菌种很难恢复原状。
(1)退化的原因
降解菌株菌丝生长缓慢，在培养基上生长弱而稀疏，弱伸入培养基深层，分泌色素差；出穗慢，发育中途停止，子实体形态不一致，大小粗细不均，颜色变化，产量低。应变退化的原因主要包括以下几个方面:
①遗传变异。遗传特征的表现是基因和环境因素共同作用的结果。当基因朝着性状差的方向突变时，即使环境条件适宜，也必然导致物种退化。
②无限演替。制种技术和条件的差异，只进行组织分离，不进行果穗鉴定，不限制继代培养，不限制转筒，加速了菌株的退化。
③营养不良。长期使用配方和成分基本相同的单一种类培养基，造成营养达不到生理要求，菌丝生长活力由旺盛、老化、退化而变弱。
(4)环境差。菌丝体生长发育过程中的不良环境和杂菌污染也会加速细菌的降解。
(2)预防措施
根据细菌老化和降解的原因，应采取以下措施:
①减少膨胀。菌种的退化和变异发生在繁殖过程中，可以通过控制移植的菌种数量来防止。获得优良菌株时，严格控制移管次数。生产中应减少应变扩展的次数。
②防止突变。菌种保存在0 ~ 4℃的低温下，如有可能，保存在液氮中的超低温下。
③分离复壮。优质菌株需要经常复壮。每次出穗后，要选择优良的子实体进行组织分离。孢子分离每年进行一次，经穗鉴定，选择性状优良。良好的组织分离。总之，有性孢子分离和无性组织分离要交替使用。有性繁殖用于寻找优良的突变品系，组织分离用于巩固这些优良品系的遗传特性。复壮的措施很多，如更换培养基、创造适宜的环境、防止杂菌污染、避免多品种混栽等。